食品微生物検査の手順
(カンピロバクター)

＜試料調製・増菌培養＞

検体25gを採取し、100mlのプレストン増菌培地を加え、30秒間ホモジナイズします。

＜微好気環境の作り方＞

微好気条件下で42℃、24～48時間培養

＜選択分離＞

増菌後の培養液を油層をできる限り避けて採取し、第一および第二選択分離培地に画線塗抹し培養します。

＜判定＞

24時間では、カンピロバクター・ジェジュニ/コリの発育は悪いので、48時間培養し、判定します。

＜純培養＞

選択分離培地上に発育した集落のうち、カンピロバクター・ジェジュニ/コリと思われる集落を計5個釣菌し、非選択培地に継代して、37℃で24～48時間微好気培養を行います。

＜同定＞

疑わしい集落を1つ釣菌し、鑑定試験を行います。 ・カタラーゼ試験 ・オキシダーゼ試験 ・菌形の観察

＜前処理＞

リンス液の場合：検体をBPW400mlでリンスする。
肉片検査の場合：検体25gを採取し、225mlのボルトンブロスを加え、ホモジナイズします。

＜前培養＞

リンス液の場合：50mlの遠沈管にリンス液27mlと倍濃度のボルトンブイヨン（ボルトンブイヨン選択剤と事前に調製）27mlと混合培養します。（微好気環境は不要）
肉片検査の場合：ストマッカー袋のまま微好気環境下で培養します。 培養液500bを1.5mlチューブへ移し、10分間加熱します。 チューブから、5bを試薬入りPCRチューブに移し、サーマルサイクラーへセットします。
プログラムは“CA“を選択し、運転します。（所要時間：75分）

PCRチューブを取り出し、Buffer Bを直接4滴入れ、200bを専用カセットのウィンドウに滴下します。
2分後、再度Buffer Bを直接カセットウィンドウに4滴入れます。
1分後に、カセットウィンドウを開け、判定します。

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